中性蛋白酶

    中性蛋白酶 : 中性蛋 白酶是最早用于工业生产的蛋白酶。大多数微 生物中性蛋白酶是金属酶,一分子酶蛋白中含 一原子锌,相对分子质量约35000～40000。等电 点pH=8～9。是微生物蛋白酶中最不稳定的 酶,很容易自溶,即使在低温冰冻干燥,也会造 成相对分子质量明显减小,热稳定性较差。最适 温度取决于反应时间,在反应时间10～30min 内最适温度为45～50℃。钙离子的存在可增加酶 的稳定性,并减少酶的自溶。酶活性中心的锌离 子,在催化过程中起着桥梁的作用,如果用其他 金属离子置换锌,可改变酶的活性,利用这点, 可制成高活性的蛋白酶结晶,以钙、钴、铜、锰、 镍置换时,可提高活性;用钡、镉、铁、钠置换,则 无活性。结晶性钙型酶的活性较普通酶高3倍以 上,以锰置换可提高活性56%,同时可提高热稳 定性。中性蛋白酶的最小合成底物是2-GlyX-NH₂,其中X必须是疏水性大分子氨基酸。 中性蛋白酶对碱性蛋白酶的合成底物几乎完全 无作用。
制法: 以枯草杆菌为菌种,以大豆饼粉或 玉米浆为氮源,以葡萄糖、淀粉、米糠等为碳源, 并加入Ca⁺⁺、Mg⁺⁺、Zn⁺⁺、Mn⁺⁺等离子,进行发 酵,离心分离,加入硫酸铵(浓度60%)进行盐 析,抽滤,烘干,即为成品。在制备过程中,为了 对酶起保护作用,每一步都必须在钙离子存在 下进行。