评价表面活性剂温和性的方法

评价表面活性剂温和性的方法有多种，目前尚缺少统一标准。目前通用的温和性评价方法主要分为活体试验（in vivo test）和离体试验（in vitro test）两大类。出于安全性考虑和满足保护动物运动的需要，目前大力提倡采用离体试验方法，但大部分立法仍以活体试验结果为检验标准。

（1）Draize兔皮试验  Draize兔皮试验主要以兔皮、有时也用大白鼠或荷兰猪皮肤作试验，以各种浓度试样对皮肤涂敷后观察红斑和浮肿程度综合给分（参见表四）。Draize兔皮试验可以作为一种独立试验，也可以作为人体皮肤试验的预备试验，一些兔皮试验结果列于表五。活体试验主要在人体皮肤和兔皮及兔眼粘膜上进行，两种较为常用的方法是Driaize兔皮试验和Draize兔眼试验。有时也采用Duhring chamber test或Cupshaking test，即对人体前腕屈曲侧部进行贴斑试验，观察表面活性剂对人体间歇试验引起的红斑和浮肿等现象。也有采用手部浸渍法，即将人手浸泡在一定浓度的表面活性剂溶液中模拟搓洗动作或洗碗碟动作，一定时间后测试浸泡前后皮肤表面的皮脂脱落率或蛋白质溶出性。

表四：Draize试验和RBC试验的评价和比较

 （2）Draize兔眼试验  将0.1mL受试液作用于白兔的角膜，间隔一定时间观察刺激结果并综合评例（参见表5）。从表6可以看出眼粘膜对表面活性剂的耐受程度也以阳离子为最低（0.5％～1.0％），阴离子型次之，对非离子表面活性剂的耐受程度最高。

表五：种表面活性剂的Draize兔皮刺激指数

表六：兔眼粘膜对几种表面活性剂刺激的耐受度

离体试验则以体外细胞或蛋白模拟生物体，观察表面活性剂对离体蛋白或细胞的作用，从而推断对活体组织的作用程度。最常用的两种离体试验方法为red blood corpuscle test（RBC test）和Zein test。　　

（1）RBC test  一般认为刺激性物质若与活体蛋白质发生反应，则反应首先会发生在细胞膜。RBC test即红血球细胞试验以离体红血球作为细胞替代物进行实验，观察各种表面活性剂对红血球细胞的作用情况。该试验中将表面活性剂对红血球细胞的溶血作用记作L值，对血红蛋白变性作用记作D值，用L/D表征综合指数来评价对细胞的刺激作用。下表列出了一些常见表面活性剂的RBC试验结果。

表七：一些表面活性剂的RBC test结果

（2）Zein test Zein是一种特定的玉米蛋白质，其自身几乎是完全不溶于水的。如果zein与表面活性剂有较大的相互作用，则作用后zein的水溶性将加大。在Zein test中，zein用于模拟活体蛋白质进行试验，通过测定与表面活性剂作用前后水溶液中氮含量的增大决定zein溶解度的变化，这种溶解度的变化反映了表面活性剂与zein相互作用的强弱，从而间接表征了表面活性剂对活体蛋白质的作用程度。